摘要
目的：建立细胞水平以H5N1高致病禽流感病毒血凝素蛋白为靶标的药理筛选模型。方法：以血凝素蛋白（HA）为病毒外壳包裹经改造的HIV核心构建HA／HIV伪病毒体系，HIV基因组中加入了荧光素酶的报告基因。应用HA／HIV伪病毒感染不同种属来源和组织来源的细胞，其中靶细胞中荧光素酶的活性反映了病毒感染细胞的水平。结果：经过条件优化，HA可以与HIV核进行包装，而通过用HA／HIV感染8种不同种属来源和8种组织来源共21种细胞系的测定，发现H5N1高致病流感病毒可以有效地感染人源细胞系（293T细胞、A549细胞和NCI-H661细胞），而对禽类来源细胞系（DF-1和QT6）、小鼠来源细胞系（A20、3T3和RAW264．7）、大鼠肺细胞系12、金黄地鼠卵巢细胞（CHO和Lecl）、非洲绿猴肾细胞（Vero E6和COS-7）和牛肾细胞系MDBK的感染能力不强。研究发现用HA／HIV病毒感染293T细胞、A549细胞和NCI-H661细胞后，被感染细胞中报告基因的表达与病毒的稀释度有剂量依赖性关系。结论：HA／HIV感染293T或A549细胞可作为H5N1高致病禽流感病毒血凝素蛋白为靶标的药理筛选模型。
