摘要
目的：研究吲哚-3-原醇（13C）对肝星状细胞（HSC）凋亡及细胞周期的影响及其机制。方法：培养永生化肝星状细胞株HSC-T6，不同浓度13C（25、50、100μmol／L）处理细胞48h后，四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞存活率；碘化丙啶（PI）染色测细胞周期；FITC-AnnexinV／PI荧光染色，流式细胞术观测细胞凋亡；荧光实时定量PCR法检测细胞凋亡相关蛋白FasL、bax、bcl-2、caspase-3及细胞周期调节蛋白CyclinD1、CDK4的mRNA表达；Western blot方法检测细胞磷酸化及非磷酸化p38信号分子的表达。结果：①MTT法显示，100mol／L及以下浓度的13C处理HSC-T6后，细胞的存活率在90％以上；②凋亡分析显示，对照组细胞没有发生凋亡，25～100mol／L13C组细胞的凋亡率分别为37．6％、64．2％和79．4％；③细胞周期结果显示，对照组细胞的S期为（58．7±4．7）％，25～100mol／L 13C使细胞的S期分别降低到（34．0±3．0）％、（26．3±3．3）％及（24．9±5．3）％，而G0／G1期细胞从（31．8±3．4）％（OM）升高到（54．6±3．0）％（100M），差异有显著性（P〈0．01）；④13C能剂量依赖性升高细胞Bax／Bcl-2及caspase-3的mRNA水平（P〈0．05），对Fas的mRNA表达无影响。同时能降低Cyclin D1和CDK4的mRNA水平（P〈0．05）；⑤13C能减少细胞内p38的磷酸化水平，呈剂量依赖性，对非磷酸化p38无影响。结论：13C可诱导体外活化的HSC凋亡，其机制与阻滞细胞周期进展、抑制p38信号途径及增加凋亡相关诱导因子的表达有关。
