小鼠PGRP-L编码区基因的克隆及序列分析

目的:获得小鼠长型肽聚糖识别蛋白(mPGRP-L)全长编码区基因。方法:采用RT-PCR技术,从BALB/c鼠肝组织总RNA中扩增PGRP-L编码区基因片段,将其插入pUCm-T载体,以PCR和测序进行鉴定。结果:从BALB/c小鼠肝脏cDNA中,分别以Primer-F和Primer-R1、Primer-F1和Primer-R为引物对进行PCR,扩增得到约1050bp的上游基因片段和约540bp的下游基因片段。以纯化的上、下游片段为模板,Primer-F和Primer-R为引物进行PCR,扩增获得约1600bp的DNA片段,并将其克隆至pMD18-T载体获得重组质粒pMD18-mPGRP-L。鉴定结果表明,mPGRP-L编码区基因全长1593bp,与GenBank中mPGRP-LcDNA比较仅2个位置的核苷酸不同,两者的同源性为99.87%。结论:成功地克隆了mPGRP-L的cDNA,为mPGRP-L分子的研究奠定了一定基础。