反相高效液相色谱法测定他克莫司软膏含量

Content determination of tacrolimus ointment by RP-HPLC

目的建立用反相高效液相色谱法测定国产他克莫司软膏含量方法。方法用28％乙腈在80℃水浴中提取他克莫司软膏，以反相高效液相色谱法测定含量。色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱（Shim-pack VP-ODS柱，150mm×4．6mm，5μm），检测波长210nm，流动相为异丙醇：乙腈：磷酸溶液（pH3．5）（35：2：63），流速为1ml／min，柱温为50℃，进样量为100μl。结果辅料对他克莫司含量测定无干扰，他克莫司与相邻峰之间的分离度良好。线性研究表明，在4．44-44．45μg／ml范围内他克莫司线性关系良好，相关系数为1．0000（n=6）。他克莫司的检测限与定量限分别为0．0889与0．222μg／ml。回收率平均值为100．2％，相对标准偏差为1．5％（n=9）。结论本法简便准确，重现性高，适用于产品的质量控制。

Objective To establish an RP-HPLC method for determination of the content of tacrolimus ointment. Methods Acetonitrile （28-100） was used to extract the ointment and the sample solution was prepared in 70℃ water bath. The HPLC condition was as followed： column： Shim-pack VP-ODS （150mm×4.6mm, 5μm）, temperature： 50℃, mobile phase： isopropyl alcohol ： acetonitrile ： phosphoric acid solution （pH adjusted to 3.5） （35 ： 2 ： 63）, flow rate： 1.0ml/min, UV detection wavelength： 210nm, injection volume： 100μl. Resuls The resolution between the peak of tacrolimus and the adjacent impurity was good. The linear range of tacrolimus was 4.44 - 44.45μg/ml （r = 1. 0000, n = 6） ; LOD was 0. 0889μg/ml; LOQ 0. 222μg/ml; the average recoveries 100. 2%. Conclusion The method is rapid, accurate, reproducible and suitable to determine the content of tacrolimus ointment.