中国特有极度濒危植物猪血木RAPD反应体系的探索

采用改进的CTAB法提取中国特有极度濒危植物猪血木(Euryodendron excelsum H.T.Chang)嫩叶总DNA,进行RAPD分析。分别研究了模板DNA、引物、dNTPs、Mg2+和Taq DNA聚合酶用量对RAPD PCR扩增反应结果的影响。筛选并建立了适合于猪血木RAPD扩增的反应体系:总体积25μL,其中10×PCR缓冲液(500 mmol/L KCl,100 mmol/L Tris-HCl,1.0%Triton X-100,20 mmol/L MgCl2)2.0μL,引物(1.5μmol/L)0.2μL,dNTPs(10 mmol/L)0.3μL,模板2μL(15 ng),Taq酶0.4μL(0.5 U),水20.1μL。