摘要
【目的】构建携带 SARS 冠状病毒刺突蛋白 N 端基因片段的重组腺病毒。【方法】从 SARS 病毒 cDNA 扩增刺突蛋白 N 端基因片段(-45~1469nt,截短的 S1区,S_N),插入腺病毒穿梭质粒 pShuttle,通过体外连接法构建重组腺病毒Ad-S_N。用 Ad-S_N 感染 Vero-E6细胞,通过 RT-PCR 和 Western blot 法检测 S_N 的表达。【结果】克隆的 S_N 基因序列与文献报道基本一致;Ad-S_N 基因组结构与预期一致。在 Ad-S_N 感染的 Vero-E6细胞中存在 S_N 基因的转录和分泌型 S_N 蛋白的表达。【结论】体外连接法是一种简便易行的重组腺病毒载体构建方法;重组腺病毒 Ad-S_N 能正确表达分泌型 S_N 蛋白,可用于诱导抗 SARS 免疫的动物实验研究。
出处
《中山大学学报(医学科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第B03期32-34,共3页
Journal of Sun Yat-Sen University:Medical Sciences
基金
国家"973计划"SARS 研究专项(2003CB514107)
教育部抗非典科技攻关项目(教技司【2003】64号)
广东省抗非典科技攻关项目(粤科社字【2003】263号)
广州市科技攻关项目(2003Z3-E0451)