SYBR Green荧光定量PCR检测外源ATP7B对于内源CP基因转录的影响

【目的】应用 SYBR Green 荧光定量 PCR 检测在正常 BRL 细胞中短暂转染人 ATP7B cDNA 后 CP 基因的转录情况。【方法】分为空质粒组(转染空质粒 Kbpala/Alb)和处理组(转染野生型 Kbpala/Alb-ATP7B),分别于转染后0、4、8、12、24、48、72、168h 提取 mRNA,逆转录后行 SYBR Green 荧光 PCR 检测人 ATP7B cDNA 及大鼠 CP 基因的转录情况。SAS11.0统计软件进行数据处理和分析。【结果】人 ATP7B cDNA 在短暂转染后约48h 转录达高峰,可持续至转染后7d 以上;经方差分析,空质粒组转染后各时间点 CP 基因的转录水平与 t=0h 相比较 P>0.05;处理组亦是。【结论】外源ATP7B cDNA 的转染及表达对于内源性 CP 基因的转录无影响。