摘要
Objectif Rechercher les mecanismes moleculaires par lesquels des calpaines extracellulaires affectent l＇adherence et la mobilite des cellules epitheliales HK-2 derivees du tubule proximal humain. Mdthodes Western blot pour detecter le clivage des chaines α des integrines; dosage radioimraunologique pour mesurer V AMP cyclique intraceUulaire; fluorescence-activated cell sorting （FACS） pour tester l＇apoptose cellulaire. La morpholo- gie des ceUules HK-2 a ete observee et photographiee. Rdsultats （ 1 ） L ＇ exposition des ceUules HK-2 a la calpaine μ n＇a pas entratne de clivage des chaines α3 et αV des integrines; （2）V exposition des cellules HK-2 -2 la calpaine μ entrafnait une augmentation progressive de V accumulation intraceUulaire d＇ AMP cyclique（ P 〈 O. 05） qui etait associee une resistance ceUulaire a Vapoptose（ P 〈 O. 05 ） ; （3）Vaddition d＇un inhibiteur pharmacologique de la protdine kinase A （ PKA ） prevenait totalement les modifications d＇ adherence et de mobilite cellulaires induites par calpaine μ. Conclusion Les calpaines externalieses peuvent modifier V adherence et la mobilite ceUulaires via un mecanisme qui implique V accumulation d＇ AMP cyclique et 1＇ activation de la PKA. Par ces mecanismes, les calpaYnes externalisees pourraient jouer un role dans Vinduction de la reparation au cours de l＇insuffucance renale aigue.
Objectif Rechercher les mécanismes moléculaires par lesquels des calpanes extracellulaires affectent l'adhérence et la mobilité des cellules épithéliales HK-2 dérivées du tubule proximal humain. MéthodesWestern blot pour détecter le clivage des chanes α des intégrines; dosage radioimmunologique pour mesurer l’AMP cyclique intracellulaire; fluorescence-activated cell sorting (FACS) pour tester l’apoptose cellulaire. La morphologie des cellules HK-2 a été observée et photographiée. Résultats (1)L’exposition des cellules HK-2 à la calpane μ n'a pas entrané de clivage des chanes α3 et αV des intégrines; (2)l’exposition des cellules HK-2 à la calpane μ entranait une augmentation progressive de l’accumulation intracellulaire d’AMP cyclique(P<0.05) qui était associée une résistance cellulaire à l'apoptose(P<0.05); (3)l'addition d'un inhibiteur pharmacologique de la protéine kinase A(PKA) prévenait totalement les modifications d'adhérence et de mobilité cellulaires induites par calpane μ. Conclusion Les calpanes externalisées peuvent modifier l’adhérence et la mobilité cellulaires via un mécanisme qui implique l’accumulation d’AMP cyclique et l’activation de la PKA. Par ces mécanismes, les calpanes externalisées pourraient jouer un rle dans l'induction de la réparation au cours de l'insuffucance rénale aiguё.
