摘要
通过噬菌体肽库技术,研究能特异性结合并具有携带目的基因进入靶细胞能力的多肽.以人乳腺癌细胞MDA-MB-231为靶细胞,与pC89噬菌体肽库共培养筛选出能特异性进入靶细胞的小肽噬菌体.Subtilisin被用于灭活未进入细胞的噬菌体,进入细胞的特异性小肽噬菌体经细胞裂解、转化E.coliXLI-Blue得到扩增.经5轮反复共培养,富集得到能特异性进入乳腺癌细胞的小肽噬菌体.以RGD-integrin binding噬菌体为对照,分别检测乳腺癌细胞特异性小肽噬菌体与MDA-MB-231、其他乳腺癌细胞株以及实体瘤细胞株的亲和性.测序并合成无噬菌体外壳蛋白的特异性多肽(CASPSGALRSC)以标记FITC;同时为了解氨基酸序列排列对特异性的影响,合成了调整氨基酸序列排列次序的多肽(CGSLSRAPSAC),并检测其与人乳腺癌细胞的特异性.实验获得与MDA-MB-231细胞特异性结合的小肽噬菌体;合成的无噬菌体外壳蛋白的多肽序列保持与MDA-MB-231细胞的特异性,并且亲和性高于嵌合蛋白(RGD-integrin).本研究建立了一种利用噬菌体肽库研究能结合或进入不同细胞的未知多肽的技术;得到了一条能与MDA-MB-231高特异性结合的氨基酸多肽序列;这种高特异性呈现氨基酸多肽序列高度依赖性;该氨基酸多肽具有作为乳腺癌基因治疗高效靶向性载体的潜在临床应用价值.
出处
《科学通报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期417-425,共9页
Chinese Science Bulletin
基金
国家自然科学基金资助项目(批准号:30460142)
