一种高度敏感检测C肽的磁分离酶联免疫荧光法

目的建立一种低成本、高敏感性检测人血清C肽（C-Peptide，C-P）的磁分离免疫荧光方法（magnetic separation enzyme immunofluorescence，MEIF）。方法用碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，AP）标记的抗C肽特异性单克隆抗体（monoclonal antibody，mAb），与异硫氰酸荧光素（fluorescein isothiocyanate，FITC）偶联的另1个抗C肽mAb配对构成双抗体夹心免疫结合，用抗FITC的多抗免疫磁珠作为固相分离载体，用4-甲基磷酸伞型酮（4-methylumbelliferyl-phosphoric acid，4-MUP）为荧光底物建立磁分离酶联免疫荧光分析法。结果方法灵敏度0．033ng／ml，批内变异系数（CV）为4．4％～5．9％，批间CV为4．3％～8．6％，稀释回收率为82．4％～119．4％，加标回收率为94．1％-113．0％。将实际样品测定与磁分离免疫发光系统检测的结果相比较有较好的相关性。结论MEIF定量测定C肽的方法成本低、灵敏度及特异性高、稳定性好，具有较好的应用前景。