杜鹃花属植物基因组DNA RAPD-PCR反应体系的优化

Optimization of the Experiment Conditions for the Randomly Amplified Polymorphic DNA Analysis for Rhododendron L.

试验通过系统比较研究,确立了杜鹃属植物RAPD-PCR的最佳反应体系,即20μL反应体系中:模板DNA(10 g.L-1)1.5μL;10×PCR buffer 2μL;Taq酶(0.5 U.μL-1)0.3μL;引物(0.8μmol.L-1)4μL;MgCl2(25 mmol.L-1)1.8μL;dNTPs(dATP、dCTP、dTTP、dGTP各含1.0 mmol.L-1)0.6μL。经试验验证,该反应体系重复性高,扩增条带亮度均匀,弥散现象少。

The reaction conditions for the Randomly Amplified Polymorphic DNA analysis for Rhododendron L.was optimized,with the 20 μL reaction system containing 1.5 μL DNA template（10 g·L^-1）,2.0 μL10×Buffer, 0.3 μL Taq DNA polymerase（0.5 U·μL^-1）,1.8 μL MgCl2（25 mmol·L^-1）,4 μL primer（0.8 μmol·L^-1）,0.6 μL dNTPs（dATP、dCTP、dTTP、dGTP each is 1.0 mmol·L^-1）.This reaction system demonstrated a high reproducibility,and the bands were clear and bright.