人脂肪干细胞分离培养鉴定及向成骨细胞诱导分化的实验研究

目的探讨在成骨诱导条件下人脂肪干细胞(adipose derived stem cells,ASCs)的体外诱导分化情况。方法脂肪组织来自整形外科吸脂者,以Ⅰ型胶原酶消化抽吸物分离其中脂肪细胞,体外培养并测定第一、二、三代细胞增殖速率,绘制细胞生长曲线,计算群体倍增时间。流式细胞仪检测抗原CD105、CD106、CD166、CD29、CD49d、CD34、CD31,分析酶消化法获得的细胞分别向成骨、成脂定向诱导,明确其分化能力。结果第一、二、三代细胞生长稳定,群体倍增时间约60 h。流式细胞仪检测显示,干细胞相关抗原CD105、CD106、CD166、CD29表达率均>60%,但与造血系统相关抗原CD34和与内皮细胞相关抗原CD31的表达率分别为7.1%和28.7%。向成骨细胞诱导可见矿化结节形成,免疫荧光检测显示骨唾液酸蛋白(bone sialoprotein,BSP)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、骨连接蛋白(osteonectin,ON)表达;向成脂肪细胞诱导可见脂滴形成。结论脂肪干细胞体外增殖能力强,来源充足,细胞获得量大,可能成为骨组织工程的种子细胞的来源。