乙肝病毒表面抗原G145R变异单克隆抗体的制备及其初步鉴定

目的：研制抗乙肝病毒G145R变异表面抗原的单克隆抗体（mAb）。方法：将重组乙肝病毒G145R变异表面抗原以Al（OH）3佐剂化,常规免疫BALB/c小鼠,采用细胞融合技术制备抗乙肝病毒G145R变异表面抗原的mAb。采用ELISA对制备物的效价与特异性进行鉴定,将其用于部分临床标本的检测,并与德国抗HBs mAb GL2.001进行比较。结果：获得1株稳定分泌抗G145R HBs mAb的杂交瘤细胞,命名为4-E12。该细胞株染色体数目为90条,所分泌mAb属IgG1亚类。其培养上清与腹水抗G145R HBs ELISA效价为（0.5-1）×10^3及（1-10）×10^6。经持续3月培养,低血清适应以及反复冻存与复苏后,其细胞增殖能力与上清抗G145R HBs效价与克隆化结束时大致相似。将其与德国抗G145R HBs mAb GL2.001相比,二者对重组乙肝表面抗原G145R变异S蛋白的反应性大致相当,灵敏度前者稍低于后者（分别为2.0μg/L与1.0μg/L）。对野生株表面抗原的检测前者在实验浓度范围内未显示有意义的反应信号,后者在与高浓度（1mg/L及以上）抗原反应时S/N值达到或高于3.9。将二者用于对一组特定患者的临床检测,其阳性率前者（17/200,8.5%）较后者（11.5%）略低,其差别经统计学比较无统计学意义（P〉0.05）。结论：成功地制备了1株抗乙肝表面抗原G145R变异体的mAb,为乙肝G145R变异的基础、临床与流行病学研究提供了进一步的物质基础。