流式细胞术Annexin V/PI检测细胞凋亡阳性界线值及补偿值的确定

目的探讨Annexin V/PI双染方法检测细胞凋亡实验中阳性界线值及补偿值的确定方法。方法用5-氟尿嘧啶、多西紫杉醇、草酸铂抗肿瘤药物诱导胃癌细胞株BGC823凋亡,用流式细胞术Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率,同时也检测了正常培养胰腺癌细胞株SW1990的自然凋亡率。比较了以"裸细胞"和"波谷"为依据设置阳性界线值两种分析方法对实验结果的影响;也比较了以"单染法"和"横平竖直法"确定仪器补偿值所带来实验结果的差异。结果以"裸细胞"和"波谷"为依据确定阳性界线值,两种实验数据分析方法得到的结果差异显著。"单染法"或"横平竖直法"确定的仪器补偿值相似,"横平竖直法"能进一步优化"单染法"所确定的仪器补偿值。结论Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率要以"波谷"为依据设置阳性界线值,以"横平竖直法"确定仪器补偿值。