山羊乳腺上皮细胞单细胞克隆的制备与鉴定

本研究旨在探索乳腺上皮细胞单细胞克隆制备的实际操作的可能性,并对其生物学特性进行鉴定。本试验从泌乳中期的徐淮山羊乳腺提取乳腺上皮细胞,纯化传至第3代,采用三种不同的方法(口吸管法、细胞稀释法以及克隆环法)将细胞接种至96孔板,采用细胞形态学与免疫组化鉴定。结果显示:口吸管法克隆形成率为0,克隆环法克隆形成率为5.9%,细胞稀释法克隆形成率为3.5%。克隆环法细胞克隆率最高,但是操作很难熟练进行,易导致克隆细胞的不纯。细胞稀释法操作简单易行,对细胞伤害小,克隆率较高。细胞形态学与细胞角蛋白18鉴定为乳腺腺泡上皮细胞。