奥利亚罗非鱼外周血白细胞分离与血细胞指数研究

鱼类外周血白细胞分离一直是一项技术难题，为探讨一种便捷、高效的奥利亚罗非鱼外周血白细胞分离方法，本实验使用76％泛影葡胺（Urografin）调整标准人淋巴细胞分离液比重，通过梯度密度离心筛选最佳奥利亚罗非鱼白细胞分离液比重，并对分离前后的细胞进行分类计数与形态观察。结果发现分离前奥利亚罗非鱼外周血细胞总数为1．5×10^9个／ml，白细胞占35％，最佳奥利亚罗非鱼白细胞分离液比重为1．082，每毫升外周血可分离得到6×10^6～8×10^6个细胞，其中白细胞可达90％以上。对分离前后的细胞进行瑞氏染色分析可明显区分出单核细胞、大淋巴细胞、小淋巴细胞和嗜中性粒细胞，且各类白细胞之间的比例分离前后基本一致。本研究成功建立了奥利亚罗非鱼外周血白细胞分离技术，测定奥利亚罗非鱼血细胞指数，并对血细胞进行了形态学观察与鉴定，这对罗非鱼细胞免疫学研究具有一定的实际意义。