结核分枝杆菌肝素结合血凝素(HBHA)蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化和鉴定

目的克隆肝素结合血凝素(HBHA)基因,并在大肠杆菌中进行表达和纯化。方法用PCR方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组扩增出HBHA基因片段,克隆至pMD18-T载体中,序列测定正确后,将其亚克隆到表达载体pQE80L并在大肠杆菌DH5α中表达,表达蛋白经SDS-PAG及Western blot分析后,亲和层析法纯化蛋白。结果克隆了HBHA基因,并对其在E.coli中进行了表达,SDS-PAGE及Western blot分析表明表达产物正确。通过亲和层析法得到28 kD纯化蛋白,与文献报道相符。结论成功获得了纯化的HBHA蛋白,为进一步研究HBHA蛋白的致病机理提供了实验依据。