siRNA干扰对NIT-1细胞株G蛋白耦联受体40表达的影响

目的利用siRNA技术抑制G蛋白耦联受体40(GPR40)在小鼠胰岛NIT-1细胞中的表达。方法化学合成3对GPR40 siRNA和1对FITC标记GAPDH siRNA,siPORTNeoFX转染试剂介导siRNA转染到NIT-1细胞中,通过转染FITC标记GAPDH siRNA以优化转染条件,在优化条件下转染三对GPR40siRNA,分别于转染24、48、72h后利用RT-PCR和western blotting检测GPR40mRNA和蛋白表达抑制率。结果根据优化的转染条件转染三对GPR40 siRNA,三对siRNA均能有效降解GPR40的mRNA并进一步抑制其蛋白表达,这一作用持续72h以上,其中siRNA1表现了最高的抑制效率。结论GPR40 siRNA可高效、特异地抑制NIT-1细胞GPR40表达。