分光光度法测定叶绿素含量及其比值问题的探讨

Methodological Study on Determination of Chlorophyll Contents and Ratio of Chl a/Chl b by Spectrophotometry

本文以水稻、棉花、玉米以及喜荫植物吉祥草为材料,采用分光光度法比较了不同性能的分光光度计对叶绿素含量及其比值测定的影响。结果表明,狭缝宽度过小或过大均导致叶绿素定量结果的相对误差增大,但仪器的波长偏移是引起测定结果误差的主要原因。波长偏差超过1nm时会影响混合溶液中叶绿素b的定量结果以及叶绿素的相对比值(Chla/Chlb),波长"蓝移"引起Chla/Chlb偏高,波长"红移"则导致Chla/Chlb偏低。波长偏移及波长重现性差是造成Chla/Chlb比值偏离其"理论比值"、导致测定数据之间缺少可比性的原因。选择具有波长自动校准功能、波长精度高、狭缝宽度在1～2nm的分光光度计用于叶绿素含量及其比值的测定则可获得可比性强、重现性好、准确度高的结果。