提高逆转录病毒滴度和靶细胞感染率方法的建立与应用

逆转录病毒载体广泛用于基因靶向治疗，干细胞基因工程，以及感染其他方法难以转染的细胞系，如某些肿瘤细胞，神经细胞，原代培养细胞等。重组小鼠干细胞病毒（recombinant murine stem cell virus，rMSCV）是一种常用的逆转录病毒载体，除可携带目的基因或DNA片段外，该载体还有药物抗性基因和绿色荧光蛋白（Green fluorescence protein，GFP）基因。因人类及多种动物细胞表达该病毒受体，所以该载体被广泛用于现代生物医学研究的各个领域。但是rMSCV仅感染增殖细胞，不感染静息细胞，靶细胞感染率通常并不高。目前，阳离子脂质体转染试剂（如Lipofectamine），高浓度阳离子多聚物（如Polybrene）和超速离心常用于浓缩病毒，以提高滴度。