Shiga毒素导向药物的初步研究

作者首次应用Ｓｈｉｇａ毒素Ａ亚基基因（ＳｔｘＡ）与ＩＬ２基因进行融合，并在二者之间插入ＩＬ２基因前１０个氨基酸编码序列作为接头，构建了一种新的融合毒素ＳｔｘＡ－ＩＬ２。所构建的融合毒素在大肠杆菌中获得了高效表达，表达量达到细菌总蛋白的１５％～２０％。经初步纯化后测活，结果表明ＳｔｘＡ－ＩＬ２能特异地杀伤含中亲和力ＩＬ２受体的淋巴肉瘤细胞ＭＬＡ１４４而对不含ＩＬ－２受体的Ｈｅｌａ细胞无明显杀伤作用。在此基础上，我们用白喉毒素跨膜转运结构域基因片段（ＤＴＢ’及ＤＴＢ”）插入ＳｔｘＡ基因与ＩＬ２基因之间进行融合表达从而构建获得了ＳｔｘＡ－ＤＴＢ＇－ＩＬ２及ＳｔｘＡ－ＤＴＢ”－ＩＬ２。白喉毒素跨膜转运结构域基因片段ＤＴＢ”较ＤＴＢ’减少了一个丝氨酸蛋白酶水解位点及一对二硫键。我们期望通过白喉毒素跨膜转运结构域基因片段的插入来增加融合毒素的跨膜转运效率。初步研究表明ＳｔｘＡ－ＤＴＢ＇－ＩＬ２及ＳｔｘＡ－ＤＴＢ”－ＩＬ２的杀伤活性较ＳｔｘＡ－ＩＬ２提高１０倍。