同工酶标记技术在金针菇品系鉴定中的应用

本文采用聚丙烯酰胺垂直板状电泳(PDGE)分析技术,研究不同生长发育期、不同组织对金针菇酯酶同工酶电泳表型的影响,筛选出不变生长发育期及常规培养条件等影响的酯酶同工酶标记区带.利用同工酶标记区带PAGE表型对不同生态型菌株进行分类鉴定.在供试8个菌株的菌丝体阶段,至少可分离出19条区带,有11条标记区带.供试8个菌株子实体发育期至少可分离出15条区带,有8条标记区带.标记区带分所有品系出现的基本带和部分品系出现的识别带,est^(100)为基本带.8个供试菌株的菌丝体酯酶同工酶标记区带PAGE表型有8种,呈多态性.子实体阶段也有7种表型.本研究在金针菇菌丝体阶段(液培10,15,20 d)3个时期、原基时期,对成熟子实体的菌柄和菌盖分别进行了酯酶同工酶检测.结果表明:酶带数最多的时期多出现在20 d和15 d,也有出现在10d.最多出现11条,最少出现5条,平均产生5.8条.标记区带最多出现7条,最少只有4条.原基时期出现区带较多,且酶带活性增加,平均产生7.4条.由于原基时期是菌丝体与子实体阶段的转折点,为此出现酶带较多(不同菌株此期的酶带数8条或7条),且酶带数相近.这与菌株的代谢调节和形态转化密切相关,显示典型的组织特异性及同工酶在组织代谢生长发育分化中的重要作用.子实体阶段菌柄、菌盖酶带数稍有减少。