用金标卡与RT-PCR对猪瘟的快速诊断及其病毒E2基因的序列分析

试验用金标卡对临床检查疑似猪瘟的病猪抗体和抗原分别进行初步检测，同时根据GenBank已发表的猪瘟病毒E2基因的cDNA序列设计并合成1对特异性引物，提取病料总RNA，通过RT—PCR技术扩增长1137kb的E2基因片段并进行验证，再将RT—PCR产物克隆到pMD18-T载体上，构建了重组质粒pMD18-T—E2，经双酶切和序列测定，说明均已成功获得了猪瘟病毒E2基因和重组体pMD18-T—E2。测序结果与国内外已发表的毒株分别进行序列同源性比较和数据分析及绘制系统进化树，结果表明：该毒株与国内标准毒株Shimen株和C株具有较高的同源性。表明用金标卡结合RT—PCR能对猪瘟进行快速诊断。