摘要
目的：开发猪戊型肝炎病毒单克隆抗体并探究其抗原识别位点对病毒的分型，疫苗开发研究和疾病的鉴别诊断具有重要意义。结果：本研究用纯化的SHEV大庆株（DQ）重组蛋白ORF2-V1免疫BALB／c小鼠，取免疫小鼠脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞进行融合，经3次克隆和间接ELISA筛选，获得了αC11、αC12、γH1、γF8、BC4和CH86株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。通过间接ELISA测定单抗效价分别为：细胞培养上清1：1．60×10^3～1：3．20×10^3，腹水为1：1．28×10^6～1：2．56×10^6：经ELISA法测定，6株单克隆抗体均与重组蛋白ORF2-V1反应，而不与ORF2其它部分片段的蛋白反应；分别用制备的6株单克隆抗体和SHEV多克隆抗血清对感染SHEV的A549细胞培养物进行了间接免疫荧光（IFA）病原的检测，同时用猪的阳、阴性血清、SP2／0细胞培养上清做对照，结果表明均呈阳性反应，说明这6株单抗可以与天然病毒发生反应；与用多克隆抗体的阳性对照相比，McAb鉴定的SHEV感染细胞培养物间接免疫荧光染色结果特异性强，排除了高背景的非特异荧光影响，对结果的判定更为准确。而以多克隆抗体作为检测抗体，IFA有一定的非特异性荧光反应。单抗的亚类鉴定结果表明，所有McAbs均为IgG1型，且所有单抗的轻链均为K链。
