人CCR7真核表达载体构建及对HeLa细胞HLA-I表达的影响

目的:构建人CCR7真核表达载体,建立稳定转染CCR7的HeLa细胞株,初步探讨肿瘤细胞表达HLA-I类分子表达改变及相关机制。方法:从人脾脏cDNA扩增出CCR7,装入pDsRed2-N1,脂质体转染HeLa细胞。CCR7配体CCL21作用后,流式细胞术(FCM)检测肿瘤细胞表达HLA-I的表达,萤虫素酶报告基因系统检测NF-κB活化。结果:经PCR、酶切和测序证实,含CCR7真核表达载体成功构建。G418筛选后获得稳定表达CCR7蛋白的HeLa细胞。FCM证实HeLa细胞表达HLA-I类分子水平增高,萤虫素酶报告基因系统证实NF-κB活化明显。结论:成功构建人CCR7真核表达载体,CCR7促进肿瘤细胞表达HLA-I类分子,诱导肿瘤细胞NF-κB活化。