川陈皮素对非小细胞肺癌NCI-H460细胞中tubulin、Raf-1及Bcl-2表达的影响

目的:研究川陈皮素对非小细胞肺癌NCI-H460细胞tubulin、Raf-1、Bcl-2表达的影响。方法:MTT法检测川陈皮素对NCI-H460细胞的生长抑制作用;用PI-Hoechst荧光双染法观察细胞凋亡形态;Western blot检测川陈皮素对NCI-H460细胞tubulin、Raf-1及Bcl-2蛋白表达的影响;体外微管蛋白聚合-解聚平衡体系研究川陈皮素对微管蛋白聚合的影响。结果:川陈皮素体外作用NCI-H460细胞24、48、72h后的IC50分别为23.5、11.3、3.81μmol/L;荧光双染色法显示经20μmol/L川陈皮素作用后细胞出现变形,染色质浓缩,产生凋亡小体;40μmol/L川陈皮素作用细胞3、6、12、24h后,未聚合的tubulin及Raf-1表达逐渐增加,Bcl-2表达呈下降趋势;10μmol/L川陈皮素在体外能破坏微管蛋白的动态平衡体系,抑制微管蛋白的聚合。结论:川陈皮素能抑制细胞中微管蛋白的聚合从而影响Raf-1及Bcl-2这一信号途径,这可能是其在体外抑制非小细胞肺癌NCI-H460细胞的生长且诱导凋亡机制。