WWOX基因杂合性丢失在恶性肿瘤发生中的作用

目的：探讨WWOX基因的改变对肿瘤发生的影响。方法：采用RT—PCR方法检测Hct116／4coildtype（野生型）、Hct116 p53 null（p53^-）、Hct116 Bax null（Bax^-）细胞株的WWOX基因表达。从琼脂糖凝胶中分离和提取DNA，进行DNA纯化，测序，测序结果与GeneBank上公布序列AF211943进行比较。结果：测序结果显示，第一对引物9F1与9R1，在T1497G有杂合性丢失，证实细胞株有二种类型的WWOX表达，全长的WWOX mRNA的转录，和外显子6～8丢失的WWOXmRNA的异常转录。第二对引物8F1与9R2，仅表达全长的WWOX mRNA的染色体才有PCR扩增，其产物在T1497G为G。第三对引物5F1与9R3，扩增产物为929bp和389bp。在389bp的T1497G，只有T，来自于WWOX mRNA的异常转录的染色体。结论：HCT116细胞株有二种类型的WWOX表达，全长的WWOX mRNA的转录，外显子6～8丢失的WWOX mRNA的异常转录，这二种转录来自两个不同的等位基因。