TGF-β_1对肌成纤维细胞MMP-2激活的影响

Effects of TGF-β1 on MMP-2 in C2C12 cells

目的:观察转化生长因子β1(TGF-β1)对鼠肌成纤维细胞(C2C12细胞)分泌基质金属蛋白酶2(MMP-2)及其激活的影响,探讨其内在机制。方法:用不同浓度的TGF-β1(0、1、5、10μg/L)干预C2C12细胞24h,200pmol/LSmad3基因短干扰RNA(siRNA-Smad3)转染C2C12细胞24h,用ELISA方法测定MMP-2及其活性型MMP-2。结果:(1)0、1、5、10μg/LTGF-β1干预C2C12细胞24h,ELISA检测总MMP-2的结果(μg/L)分别为177±20、180±15、171±18、179±28,方差分析无显著差异(P>0.05);活性型MMP-2分别为23.09±4.37、14.42±2.30、9.50±1.18、4.48±0.69,比较差异显著(P<0.01)。(2)5μg/LTGF-β1干预C2C12细胞4h、12h和24h,总MMP-2ELISA值分别为160±16(对照组)/157±17(干预组)、174±6/174±16、187±12/189±18,不同时点干预组总MMP-2值比较无差异,P>0.05;活性型MMP-2值分别为:16.92±1.26(对照组)/16.53±2.56(干预组)、22.70±3.03/8.00±2.02、23.15±2.66/9.39±2.60,干预组活性型MMP-2值比较有差异,P<0.01。(3)200pmol/LsiRNA-Smad3转染C2C12细胞24h,再用5μg/LTGF-β1干预C2C12细胞24h,活性型MMP-2值分别是20.80±1.53(siRNA-control,空白对照组)、9.82±2.18(siRNA-control+5μg/LTGF-β1,内对照组)、20.09±2.27(siRNA-Smad3+5μg/LTGF-β1,实验组);实验组和内对照组比较差异显著(P<0.01),实验组和空白对照组比较无显著差异(P>0.05)。结论:TGF-β1并不影响C2C12细胞分泌MMP2,但显著抑制MMP-2的活化;siRNA-Smad3阻断Smad3信号转导可以消除TGF-β1对MMP-2活化的抑制作用。