香菇中γ-谷氨酰转肽酶的分离纯化及其酶学性质研究

Purification and Properties of γ-Glutamyltranspeptidase from Lentinula edodes

通过(NH4)2SO4沉淀、Phenyl Sepharose FF疏水层析分离纯化香菇中的γ-谷氨酰转肽酶(γ-Glutamyltranspeptidase,GGT),纯化后的GGT的比活力到达了19.59U/mg。SDS-PAGE分析表明,GGT由分子量分别为28kDa和60kDa的两个亚基组成。酶学性质试验结果表明,GGT反应的最适温度为37℃,最适pH值为7.6;金属离子Na+、K+和Ca2+对酶有激活作用,而Ag+、Cu2+、Zn2+和Fe3+则有抑制作用;试验范围内,GGT水解γ-glutamyl-p-nitroanilide的米氏动力学参数Km值为2.601μmol/mL,Vmax值为0.0287μmol/min;组成的氨基酸中,Glu和Asp含量较高,Met和Cys含量较低。