人白细胞介素-13基因的克隆与表达

目的构建一个能在原核高效表达人白细胞介素－１３（ＨＩＬ－１３）的系统。方法采用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）获得ＨＩＬ－１３的ｃＤＮＡ，将其克隆至原核表达载体ｐＧＥＸ－２Ｔ后进行诱导表达。结果合成了特异编码ＨＩＬ－１３的ｃＤＮＡ，构建了原核表达质粒ｐＧＥＸ－２ＴＨＩＬ－１３，对其进行序列分析表明，表达质粒中的插入片段为ＨＩＬ－１３基因；诱导表达出含有ＨＩＬ－１３的融合蛋白谷光苷肽－Ｓ－转移酶－ＨＩＬ－１３（ＧＳＴ－ＨＩＬ－１３），其相对分子质量为３９０００。结论（１）从Ｔ淋巴细胞中克隆出ＨＩＬ－１３基因。（２）ＨＩＬ－１３ｃＤＮＡ在原核细胞表达的蛋白占菌体总蛋白的３７％。