HPLC法测定头孢氨苄的血药浓度

目的优化头孢氨苄血药浓度测定方法。方法采用HPLC法,以头孢哌酮为内标,YWGC18色谱柱(4.6 mm×250 mm,10μm),以水-甲醇-2.5 mol.L-1醋酸铵-冰醋酸(体积比为90.000∶30.000∶0.450∶0.016)为流动相,流速为1.0 mL.min-1,检测波长为254 nm;柱温为室温。结果血浆样品的预处理:精密吸取全血分离血浆0.5 mL于具塞塑料离心管中,加入0.1 mL头孢哌酮(100 mg.L-1内标)和0.2 mL的质量分数为10%的三氯乙酸沉淀试剂,漩涡震荡1 min混合后10 000 r.min-1离心5 min,取上清液进样测定。以头孢氨苄峰面积和内标峰面积比(Y)对头孢氨苄浓度(X)回归分析,方程为Y=0.121 5X+0.032 1,r=0.999 5(n=7),线性范围为0.5～100.0 mg.L-1,提取回收率>88.83%(n=5),方法回收率为92.6～102.6%,日内RSD≤3.46,日间RSD≤5.71%,且稳定性良好。结论HPLC法可用于测定头孢氨苄的血药浓度。