LPS诱导动物胆汁淤积模型的制备及微管蛋白对BSEP功能影响的研究

目的通过紫杉醇大鼠腹内给药以探讨微管蛋白对BSEP表达及分泌转运功能的影响；LPS腹腔注入法制备成年大鼠胆汁淤积性肝病模型以研究BSEP表达与胆汁淤积性疾病之间的关系。方法用大肠杆菌脂多糖（LPS）腹腔注入法制备成年大鼠胆汁淤积性肝病模型。将大鼠随机分为9组，生理盐水对照组，LPS注入组及紫杉醇注入组后8h组，48h组。1周组，各组n=5。所有动物于存活设定时间处死，抽取血清送检血清碱性磷酸酶、胆汁酸及总胆红素水平以了解胆汁淤积程度；肝脏冰冻切片于共聚焦激光扫描荧光显微镜下观察肝细胞胆管膜侧BSEP表达情况。结果血清酶学检测发现LPS注入组其血清碱性磷酸酶活性、胆汁酸及总胆红素值均较同一时间生理盐水对照组明显增高，共聚焦荧光图片发现LPS注入后肝细胞毛细胆管膜附近BSEP蛋白成像较生理盐水组模糊，胆管结构欠清甚至部分缺失。而紫杉醇注入组碱性磷酸酶活性、胆汁酸及总胆红素值较生理盐水组增加，可见胆汁淤积。共聚焦荧光图片结果显示．毛细胆管膜侧BSEP蛋白较同一时间生理盐水组成像模糊变淡，可见缺失胆管结构。结论LPS腹腔内注入大鼠后可引起明显的胆计淤积，共聚焦图象发现肝细胞毛细胆管膜侧BSEP表达明显减少，故认为BSEP表达减少或功能异常与胆汁淤积性疾病间关系密切；紫杉醇促进微管蛋白装配成微管，但抑制微管的解聚．从而影响了微管的正常功能，导致肝细胞毛细胆管膜侧BSEP蛋白表达及其转运功能明显下降，引起显著胆汁淤积，表明微管蛋白功能在BSEP表达及转运中起着重要作用。