猪肝微粒体中细胞色素P450 CYP2A19和CYP1A的分离

细胞色素P450为一类蛋白质超家族,在许多化学物质的生物转化中起重要作用,如纯化的CYPs可用于结构的研究或测定药物的代谢途径。本研究中,猪肝微粒体细胞色素P450(CYP)经octylamino琼脂糖和羟基磷灰石柱层析,纯化出CYP1A和CYP2A19两种CYPs。经Western blotting鉴定,抗大鼠和人的CYP1A2抗体能识别猪CYP1A;抗人的CYP2A6抗体能识别CYP2A19。通过特定的底物7-乙氧异吩唑酮、7-甲氧基-3H-吩恶嗪-3-酮(CYP1A)和香豆素(CYP2A19)测定酶的活性,酶分离结果表明,动力学参数与人的模式相类似。因此,猪肝微粒体细胞色素能用来检测兽药的新陈代谢及在猪肉中的药物残留。结果表明,在检测人外源化学物质的生物转化时,猪可能是一个合适的试验模型。