人乳头瘤病毒16型（湖北株）E7基因逆转录病毒重组体的 …

将Ｅ７－ＨＢ基因克隆进逆转不病毒载体构建重组体ＰＬ。重组体的鉴定采用双酶切，重组体导入ＮＩＨ／３Ｔ３细胞采用磷酸钙沉淀法。Ｅ７－ＨＢ基因在真核细胞中的转录和表达的检测用ＲＴ－ＰＣＲ和间接免疫荧光法。结果发现，重组体导入３Ｔ３细胞后４８小时即可检测到Ｅ－７８ｍＲＮＡ的转录，在用免疫荧光染色的细胞涂片上可看到黄绿色的荧光颗粒。这表明Ｅ７－ＨＢ基因逆转录病毒重组体构建正确。