一种新的蝮蛇蛇毒蛋白组分的分离纯化及其对肿瘤细胞的作用

目的:用高效液相色谱一步法分离江浙蝮蛇蛇毒中的组分,研究其纯度、分子量、氨基酸序列及其体外抗肿瘤细胞增殖的生物学活性。方法:采用高效液相色谱法分离蛇毒组分,并测定其纯度;用Micromass ZQ质谱仪测定其分子量;用Edman降解法测定蛇毒组分N端的15个氨基酸序列,并用CCK-8方法检测蛇毒蛋白组分对肝癌细胞Hep38增殖的作用。结果:用高效液相色谱一步法从江浙蝮蛇蛇毒中分离出一种新的组合,并命名为AHP-4,纯度在98%以上,分子量为7554 Da。AHP-4N端1～15个氨基酸是N-EAEEADEDDDAAAANC,经Genebank检索后,表明AHP4是一种新的蛇毒组分。该组分对Hep3B细胞的增殖有剂量依赖性的抑制作用。结论:用高效液相色谱一步法从蝮蛇蛇毒中分离了一种新的组分AHP-4,该组分能以剂量及时间依赖的方式抑制肿瘤细胞Hep3B和肺癌细胞A549的增殖。