T6-17细胞膜表面P185蛋白表达的研究

目的探究T6-17细胞膜表面肿瘤标志物P185蛋白的表达,并确定该蛋白的表达量和分布情况,并与乳腺癌组织石蜡切片免疫组化结果比较,进而探究其在病理学诊断中作为阳性对照应用的可能性。方法六孔板中内置多聚赖氨酸处理过的盖玻片,加入T6-17细胞悬浮液培养24-48h制备成细胞爬片,4%甲醛固定,0.1%TrtionX-100工作液处理增加通透性,PBS洗涤后用免疫组化SP法处理,DAB显色,镜下观察并控制染色程度,与高表达P185蛋白的乳腺癌患者的组织石蜡切片免疫组化结果比较。结果细胞爬片和组织切片免疫组化结果均显示P185蛋白主要分布于细胞膜上。镜下观察细胞爬片可见5%以上细胞染成棕黄色,呈连续线状环绕细胞膜,可判定为中度阳性,与抗体浓度3.125 mg.L-1时的组织切片染色程度相当。结论T6-17细胞膜表面表达大量的P185蛋白,其细胞爬片可以在临床应用中作为免疫组化检测中的阳性对照。