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抗精子单克隆抗体6B10的免疫定位及其相应抗原分析

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摘要 利用杂交瘤技术制备小鼠抗精子单克隆抗体 6B1 0 ,为IgG型免疫球蛋白 .通过 (NH4) 2 SO4盐析并结合蛋白A SepharoseCL 4B亲和层析法纯化单克隆抗体6B1 0 ,用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳分析抗体纯度 .采用金霉素荧光染色法 (CTC)检测精子顶体反应 ,发现单克隆抗体 6B1 0可以显著地抑制孕酮诱导的精子顶体反应 .采用间接免疫荧光法和胶体金免疫电镜观察发现单克隆抗体 6B1 0的相应抗原定位于精子顶体质膜上 .用 1 %TritonX 1 0 0抽提精子全蛋白 ,采用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳结合免疫印迹实验 (Westernblot)发现单克隆抗体 6B1 0所识别的抗原为 5 0ku的蛋白 ,此蛋白为精子顶体反应发生过程中的关键蛋白之一 。
出处 《中国科学(C辑)》 CSCD 1998年第6期548-553,共6页 Science in China(Series C)
基金 国家自然科学基金资助项目 !(批准号 :395 70 36 7)
  • 相关文献

参考文献2

  • 1Shi Q X,Biol Reprod,1995年,52卷,373页
  • 2Roldan E R S,Science,1994年,266卷,1578页

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