结核分支杆菌链霉素耐药基因的杂交检测

目的探讨结核分支杆菌对链霉素(Sm)的耐药分子机制,评估应用PCR-寡核苷酸探针反相斑点杂交技术检测rpsL、rrs基因突变在结核分支杆菌对链霉素耐药性测定中的应用价值。方法采用PCR-寡核苷酸探针反相斑点杂交技术对55株结核分支杆菌临床分离株(其中药物敏感株23株,耐INH或含耐,INH耐多药株32株)和25例耐SM肺结核患者痰标本的rpsL、rrs基因突变进行检测。结果以结核分支杆菌H37RV为对照,23株药物敏感株的rpsL、rrs基因突变率分别为4.3%、0。32株耐链霉素分离株中,21株rpsL基因发生突变,突变率为65.6%;4株rrs基因发生突变,突变率为12.5%。25例耐链霉素肺结核患者痰标本中,rpsL基因18例扩增阳性、rrs基因14例扩增阳性,其基因突变检测率分别为50.0%、7.2%。结论rpsL、rrs基因突变是INH耐药性的重要分子机制。PCR-寡核苷酸探针反相斑点杂交技术可以快速、准确地检测结核分支杆菌rpsL、rrs基因突变,该技术有望直接用于临床标本耐药性检测。