可磷酸化底物肽促进基因转染效率的研究

目的进一步探讨可磷酸化碱性短肽提高短肽作为基因转移载体的转染效率。方法合成基序为LLL-RRRDNEY*FY*VRRLL的短肽(SP),以体外磷酸化实验观察哺乳动物细胞裂解液使SP磷酸化并促进SP/DNA复合物种DNA的释放。以荷荧光素酶报告基因的SP/DNA复合物转染C2C12细胞,观察转染效率。结果细胞裂解液可有效地使可磷酸化短肽发生磷酸化,并促进DNA与SP的解离。可磷酸化短肽对C2C12细胞的转染效率显著高于不可磷酸化短肽。结论可磷酸化短肽可以显著提高短肽的转染效率,外源DNA与SP载体在细胞内的解离情况对SP/DNA复合物的转染效率具有重要影响。