摘要
构建了含有大鼠NT-4基因的双拷贝逆转病毒载体,用电穿孔方法转染PA317包装细胞,获得重组逆转录病毒,再用该病毒感染肌母细胞(L-6TG)筛选出表达最高的作为NT-4基因工程细胞,表达的NT-4蛋白经PC12细胞检测具有神经营养活性,表达量为:500U/(10^6cells/24h)。
参考文献23
-
1Levi-Montalcini R,The nerve growth factor 35 years later.Science,1987;237:1154-1162.
-
2Thoenen H,The changing science of neurotrophic factor,TIN,1991;14(5):165-170.
-
3Finn H,Csrlos FI,Hakan P,Evolutionary studies of the nerve growth factor family reveal a novel member abundantly expressed in xenopus ovary.Neuron,1991;6:845-858.
-
4IP NY,Li YP,George DY,et al.Cultured hippocsmpal neurons show responses to BDNF, NT-3 and NT-4,but not NGF,J Neurosci,1993;13:3394-3398.
-
5Josette C,Hiroyuki N,Regulation of neuropeptides expression in brsin by neurotrophins potential role in vivo.Mol Neurobiol,1995;10(2-3):135-149.
-
6Funakoshi H,Bellusrdo N,Arenas E,et al.Muscle derived neurotrophin-4 as an activity-dependent trophic signal for adult motor neurons.Science,1995;268:1495-1499.
-
7Lavai MM,Unoki K,Yasumura D,et al.Multiple growth factor,cytokines.and neurotrophins rescue photoreceptors from the damsging effects of constant light.Pro Natl Acad Sci USA,1992;89:11249-11253.
-
8Kolitsos EV,Cavouette MH,Berkemeier LR,et al.Neurotrophin 4/5 is a trophic factor for mammalian facial motor neurons.Proc Natl Acad Sci USA,1994;91:3304-3308.
-
9Sambrook J,Fritsch EF,Msniatis T,Molecular Cloning,A Lboratory Annual,2nd,New York Cold Spring Harbor Laboratory Press,1990.
-
10White BA,PCR Protocols,Human Press,Totowa,New Jersey,1993.
同被引文献8
-
1杜卓民,实用组织学技术(第2版),1998年,144页
-
2Yan Q,J Neurobiol,1993年,24卷,12期,1555页
-
3杜卓民,实用组织学技术,1998年,144页
-
4Wang V,Eur J Neurosci,1993年,5卷,466页
-
5Yan Q,J Neurobiol,1993年,24卷,1555页
-
6Ip N Y,J Neurosci,1993年,13卷,3394页
-
7Zhang Y,J Neurosci Res,1998年,54卷,554页
-
8Li Y,Science,1997年,277卷,9期,2000页
引证文献3
-
1侍坚,路长林,曲伸,何小龙,王成海.移植NT-4基因修饰细胞对大鼠前角运动神经元损伤的保护作用[J].第二军医大学学报,1999,20(3):158-160. 被引量:3
-
2侍坚,曲伸,路长林,何小龙,王成海.移植神经营养素-4基因工程细胞对脊髓前角神经元的保护作用[J].生理学报,1999,51(2):128-132. 被引量:1
-
3朱伟,侍坚.脊髓损伤的基因治疗[J].生物化学与生物物理进展,2001,28(1):29-32.
二级引证文献4
-
1孟秀梅,韩志涛,胡亚卓,张红红.山莨菪碱对乙醇诱导脑损伤大鼠记忆能力的影响[J].中国组织工程研究与临床康复,2007,11(5):875-878.
-
2许斌,李家顺,贾连顺,何成,吴宏.睫状神经营养因子对脊髓神经元的保护作用[J].第二军医大学学报,2000,21(5):409-411. 被引量:7
-
3宋海涛,贾连顺,陈哲宇,路长林.胶质源性神经营养因子对脊髓损伤后前角运动神经元的保护作用[J].第二军医大学学报,2000,21(5):412-415. 被引量:17
-
4刘洁,方秀斌.神经营养因子4/5的研究进展[J].解剖科学进展,2001,7(3):253-256. 被引量:1
-
1侍坚,曲伸,路长林,何小龙,王成海.移植神经营养素-4基因工程细胞对脊髓前角神经元的保护作用[J].生理学报,1999,51(2):128-132. 被引量:1
-
2孙元田,肖冰,徐洁杰,潘克俭,陈平,胡火珍.人神经营养素-4基因的原核表达与纯化[J].四川大学学报(自然科学版),2005,42(3):588-591.
-
3侍坚,路长林.神经营养素-4研究进展[J].国外医学(分子生物学分册),1999,21(1):25-27. 被引量:1
-
4王小标,陈昌杰.人神经营养素-4的克隆及其在原核细胞的表达[J].蚌埠医学院学报,2001,26(1):7-8. 被引量:1
-
5段小红,徐可为.微囊化基因工程细胞研究进展[J].药物生物技术,2004,11(3):199-202.
-
6张华 ,胡海涛 ,任惠民 ,刘勇 ,朱宏亮 ,杨广笑 ,王全颍 ,孙乃学 ,Zhang Hua ,Hu Haitao ,Ren Huimin ,Liu Yong ,Zhu Hongliang ,Yang Guangxiao ,Wang Quanying ,Sun Naixue .人神经营养素-4成熟蛋白基因克隆[J].神经解剖学杂志,2004,20(5):439-443. 被引量:1
-
7陈昌杰,何蕴韶.人神经营养素-4基因的扩增及序列分析[J].四川解剖学杂志,2000,8(3):133-135. 被引量:1
-
8李云宝,孙燮均,姚曾序.人生长素基因工程细胞C-4系的无血清培液培养[J].细胞生物学杂志,1994,16(2):89-91.
-
9张华,赵家良,胡海涛.构建重组表达质粒pBV220/mhNT-4及mhNT-4在大肠杆菌中的表达[J].中国科技论文,2006,6(4):263-268.
-
10马晓骊,黄秉仁.神经营养素-4(NT-4)在昆虫杆状病毒表达系统中的克隆与表达[J].中国医学科学院学报,2001,23(2):141-144. 被引量:4