抗HIVp24单链抗体的基因构建及序列测定

CloningandSequencingofAntiHIVp24SingleChainFragmentofVariableRegionWeiYunlin,HeShaoqing,LiQihan,et al. (DepartmentofImmunology,Instituteof MedicalBiology,CAMS&PUMC,Kunming 650107) Abstract Usingphagedisplaytechnology,cDNAlibraryofantiHIVp24ScFvwasconstru

应用重组噬菌体抗体系统，从经过ＨＩＶ全蛋白裂解物及ｐ２４免疫过的鼠脾细胞ｍＲＮＡ中构建出组合单链抗体（ＳｃＦｖ）ｃＤＮＡ文库。ｃＤＮＡ文库克隆到噬菌粒载体ｐＣＡＮＴＡＢ５Ｅ，转化大肠杆菌ＴＧ１，得到２５×１０７个氨苄抗性菌落。通过噬菌体表面呈现，用ｐ２４蛋白对表达的重组噬菌体单链抗体文库进行两轮亲和富集获得一株特异性好的抗ｐ２４的噬菌体单链抗体。经ＥＬＩＳＡ鉴定，该噬菌体呈ｐ２４结合ＥＬＩＳＡ阳性的滴度小于１０７ｐｆｕ／ｍｌ。并对ＳｃＦｖ进行了序列分析，对今后的应用奠定了基础。