药用植物胡黄连ISSR-PCR反应体系的建立与优化

目的优选胡黄连稳定的ISSR-PCR反应体系。方法采用4因素(dNTPs、Mg2+、Taq酶、引物)4水平的正交实验和单因子梯度优化相结合的方法。结果适于胡黄连的25μl的ISSR-PCR反应体系中各因素最佳浓度分别为10×buff-er2.5μl,dNTPS150μmol/L,Mg2+1.5 mmol/L,Taq酶1U,引物0.5μmol/L,DNA20 ng或10×buffer 2.5μl,dNTPs150μmol/L,Mg2+2 mmol/L,Taq酶0.5U,引物0.5μmol/L,DNA20 ng。结论对于胡黄连ISSR-PCR实验,一次正交实验完全可以建立起满足要求的PCR体系。