K值校准法在5’-NT测定中的应用

5’-核苷酸酶（5’-NT）是5’-核苷酸磷酸水解酶,特异性地催化5’-核苷酸磷酸盐水解释放核苷酸和磷酸盐的反应。利用其原理,采用测定次黄嘌吟释放速率5’-NT比色测定法,以 5’-腺苷-磷酸（5’-IMP）作底物,经5’-NT催化释放出的次黄苷,在过量的对核苷特异的核苷磷酸化酶（NP）和黄瞟呤氧化酶（XO）存在下,被转化成次黄瞟呤和尿酸,产生过氧化氢（H2O2）,再经Trinder’s反应,由过氧化物酶（POX）和受体系统2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸（THIBA）,氧化4-氨基安替比林（4-AA）显色,在510nm比色测定H2O2生成速率。根据这个反应机理,运用法国梅里埃5’-NT试剂盒。