高效液相色谱法测定细胞裂解液中多胺的含量

目的:建立肿瘤细胞样品中多胺的HPLC测定法。方法:取处理好的肿瘤细胞裂解液样品,以1,7-庚二胺(DAH)为内标,经苯甲酰氯柱前衍生,乙醚提取衍生物。HPLC分析条件:LunaC18柱(150mm×4.6mm,5μm)为固定相,乙腈-水(62∶38)为流动相,流速为1.0mL·min-1,检测波长为254nm。结果:多胺中的腐胺、精脒和精胺能较好分离。腐胺的检测限为35.36μg.L-1,精脒为88.90μg.L-1,精胺为77.74μg.L-1。多胺各对照品中,腐胺在1.04～3.12mg.L-1之间,精脒在2.54～7.62mg·mL-1之间,精胺在2.99～8.97mg·mL-1之间,其线性关系均良好,相关系数(r)均大于0.999。腐胺、精脒和精胺平均加样回收率分别为96.84%,92.70%,90.05%。结论:建立了测定细胞多胺含量的HPLC方法,该方法简便、灵敏,能够满足肿瘤细胞样品中多胺含量测定的需要。