PCR介导化学合成广谱细胞生长因子基因半分子

目的建立一种通过ＰＣＲ介导的单链法人工合成基因的新方法。方法采用固相亚磷酰胺法，化学合成广谱细胞生长因子基因５′端半分子各寡核苷酸片段，其间按搭桥方式相接，通过重叠ＰＣＲ扩增的方法以获得全长半分子基因，再通过带酶切位点的两端引物扩增，以获得大量特异的半分子基因，而后克隆，测序，筛选阳性重组子。结果随机检测４个阳性重组子，有３个序列完全正确，一个有一位点突变。结论ＰＣＲ介导的单链化学合成法是一种简单、有效的人工合成基因的新方法。