骨唾液酸蛋白与乳腺癌细胞黏附性的相关性

The Association Between Bone Sialoprotein and Adhesion of Breast Cancer Cells

[目的]探讨骨唾液酸蛋白(BSP)与人乳腺癌细胞黏附性的相关性。[方法]构建pCDNA3.1-myc-hisA(+)-BSP真核表达载体,在COS7细胞中表达并纯化BSP全长蛋白。以纤黏连蛋白、胶原和重组BSP蛋白包被96酶标板,细胞黏附实验检测MCF-7和MDA-MB-231在上述基质的黏附性。构建BSP正义和反义表达载体,及同pCDNA3.1(-)空载体稳定转染人乳腺癌细胞MCF-7获得稳定细胞株。细胞黏附实验检测不同BSP表达水平的各组MCF-7稳定细胞株在纤黏连蛋白(FN)和胶原(collagen)上的黏附性。免疫细胞化学检测各组MCF-7稳定细胞株中E-cadherin的表达。[结果]成功表达人骨唾液酸蛋白并证实其具有黏附性。分析不同BSP表达水平的乳腺癌细胞在不同基质上黏附性,结果显示转染正义BSP的MCF-7细胞在不同基质上的OD595值(FN:1.93±0.06;collagen:1.82±0.15)显著高于反义组(FN:0.83±0.19;collagen:0.89±0.08)、空载体转染组(FN:1.49±0.18;collagen:1.44±0.09)和亲本细胞组(FN:1.52±0.27;collagen:1.42±0.12),有统计学差异(P<0.05)。转染正义BSP的MCF-7细胞中E-cadherin的表达与其它组别相比明显降低。[结论]BSP以RGD序列介导细胞黏附,其表达水平与乳腺癌细胞黏附性相关。