检测血清甲胎蛋白的双位点一步法ELISA及其临床应用

应用两种针对不同抗原位点的单克隆抗体(MeAb)建立的双位点一步法ELISA,简称两点一步法,检测抗原物质,不仅操作简便、快速,而且还可以达到改善检测系统灵敏度、精确性及重复性的目的。 1981年Votila首先报道用二点一步法检测人血清甲胎蛋白(AFP)含量,证明了这一方法的优越性。1986年刘杲等报道了抗人AFP McAb的制备、双位点夹心ELISA的建立及在检测血清AFP中的初步应用。1987年周鸣、刘杲报道了检测血清AFP的两点一步法。我们应用两种抗AFP不同抗原位点的McAb,通过选择合适的抗体提纯方法,应用马来酰亚胺法制备辣根过氧化物酶(HRP)-Fab’结合物以及选用灵敏的四甲基联苯胺(TMB)底物等方面的工作,建立了适合于临床检测用的血清AFP两点一步ELISA测定法。