红花黄素腹腔注射联合骨髓间充质干细胞移植对大鼠损伤脊髓修复作用的研究

目的研究红花黄素腹腔注射联合骨髓间充质干细胞（MSCs）移植对SD大鼠脊髓损伤模型的修复作用。方法MSCs体外分离、培养并用GFP标记。把30只用改良Allen法造模的T7平面损伤的SD大鼠随机分为3组：A组和B组损伤局部直接移植标记后的MSCs（GFP—MSCs）6×10^6／60μl，C组注射同等体积PBS。A组术后按40mg／kg的剂量腹腔注射红花黄素，B组和C组注射同等剂量的生理盐水，每日1次，共用2周。术后1周、2周、3周和4周采用BBB评分法进行后肢功能评分；荧光显微镜观察移植的MSCs；免疫组化检测GFAP、NeuN和NGF的表达。结果术后1周时的BBB评分得分A组（1．67±0．41），B组（1．21±0．28），C组（0．86±0．21），差异无统计学意义（P〉0．05），随着时间的推移，所有组别的BBB评分得分均增高，术后4周时A组评分得分为（19．67±1．21），B组为（15．83±1．17），C组为（10．04±1．48），差异有统计学意义（P〈0．05）；损伤的脊髓节段可见GFP阳性细胞；免疫组化结果显示所有组别的GFAP、NeuN和NGF的表达随时间的推移而增高，术后3周时A组、B组和C组GFAP的阳性面积分别为（46410±3128）、（32594±2335）和（2299±225），NeuN的阳性面积分别为（57494±3121）、（25338±2484）和（5204±262），NGF的阳性面积分别为（51614±3348）、（32586±1998）和（5240±180），A组和B组各项指标阳性面积达高峰；术后4周时A组、B组和C组GFAP的阳性面积分别为（45006±4606）、（31629±2065）和（2480±171），NeuN的阳性面积分别为（53546±3103）、（23280±1750）和（5263±384），NGF的阳性面积分别为（50755±3023）、（31869±1930）和（5835±453），C组各项指标阳性面积达高峰，但仍低于同期A组和B组的水平，相同时间点相同指标比较，A组和B组的表达水平明显高于C组，A组的表达水平又高于B组和C组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论MSCs移植可以促进大鼠后肢功能恢复，红花黄素腹腔注射和MSCs移植联合应用具有协同作用。