包被丙型肝炎病毒F蛋白的间接酶联免疫吸附试验的建立

目的优化检测丙型肝炎病毒(HCV)感染者血清抗-F的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)反应参数,为F蛋白用于ELISA试验提供依据。方法基因工程密码子优化后,表达、纯化了HCV F蛋白。以此蛋白为包被抗原,通过筛选反应条件,建立起检测HCV感染者血清抗-F的间接ELISA试验。结果 F抗原最佳包被浓度为1.0 ng/μL;最佳封闭条件为0.15%BSA的PBST液;血清最佳稀释度为1:10,37℃作用1 h;酶标2抗最佳稀释度为1:10 000,37℃孵育0.5 h。结论本研究初步确定了以HCV F蛋白为包被抗原,间接ELISA试验检测血清抗-F的反应参数,为后续ELISA试验打下基础。