摘要
以高滴度的LKM1抗血清为免疫探针,采用噬斑原位印迹法,筛选构建于λgt11噬菌体中的人肝cDNA文库。经噬斑分析,挑选阳性克隆;阳性克隆噬菌体经扩增后分离纯化其cDNA,在构建重组质粒的基础上,采用Sanger双脱氧链末端终止法对靶基因进行全序列测定,结果表明该cDNA含有1195个碱基,所测得碱基序列经计算机分析明确为CYP2D6cDNA中的一段特定基因。
Inthisstudy,hightiterLKM1antiserumwasusedasimmuneprobetoscreenthecDNAexpressionlibraryconstructedingt11phagePositiveplaqueswereidentifiedandpickedoutAfter3roundsofretiteringandrescreening,acloneofpositiverecombinantphagewasobtainedandamplifiedThephageDNAwasextractedandthecDNApurifiedAfterarecombinantplasmidwasconstructed,thecompletesequenceoftargetgeneswasdeterminedby Sangers dideoxychainterminationmethodTheexperimentalresultsshowedthatthiscDNAcontained1195bases,thebasesequenceofwhichappearedtobeadefinitefragmentofhumancytochromeP450IID6(CYP2D6)bycomputeranalysis
出处
《上海免疫学杂志》
CSCD
北大核心
1999年第2期75-78,共4页
Shanghai Journal of Immunology
基金
国家自然科学基金
关键词
抗体
CPY2D6
克隆
测序
AIH-H
liverkidneymicrosomal1antigen
cytochromeP450IID6(CYP2D6)
gene
cloning
sequence